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作為產品科(ke)學(xue)(xue)家(jia)，在(zai) CST 工作的(de)6年間(jian)，我(wo)的(de)大部分職責是測試(shi)公(gong)司 ELISA 試(shi)劑盒(he)的(de)批間(jian)差異，以確保批次(ci)間(jian)的(de)一致性(xing)(xing)。科(ke)學(xue)(xue)可重復性(xing)(xing)是 CST 的(de)核心價值觀，這在(zai)我(wo)們嚴格驗證標準中已體現。最終，我(wo)們希(xi)望無論客戶(hu)收到哪一批次(ci)的(de)試(shi)劑盒(he)，他(ta)們的(de)研究可以不中斷，且結(jie)果可信任。通過(guo)按照公(gong)司既定的(de)標準操作規程 (SOP) 生產每(mei)個(ge)批次(ci)的(de)ELISA 試(shi)劑盒(he)，可確保研究人員獲(huo)得(de)的(de)結(jie)果具有一致性(xing)(xing)、可靠性(xing)(xing)。
ELISA 試劑盒批次測試要求 在(zai)向研(yan)究人(ren)員(yuan)提供任一(yi)(yi)新(xin)批(pi)次 ELISA 試劑盒之前，我們都進(jin)行(xing)一(yi)(yi)系(xi)列全面測試。這些測試起到確認新(xin)批(pi)次對目(mu)的靶標具有高度特(te)異性（低背景信(xin)號）、與當前批(pi)次相(xiang)當的靈(ling)敏度和具有產生寬動態(tai)范(fan)圍靈(ling)敏度曲線的能力。 我們會進行如下測試：
01 有陽性對照和陰性對照的測試
根據 ELISA，用(yong)(yong)于驗(yan)證目的(de)(de)(de)的(de)(de)(de)對照可以(yi)是生物學(xue)相關的(de)(de)(de)樣(yang)品或靶標蛋白內源水平(ping)已知(zhi)（高表(biao)達和低(di)表(biao)達）的(de)(de)(de)樣(yang)品。通過同(tong)時用(yong)(yong)老批(pi)次和新批(pi)次的(de)(de)(de) ELISA 試劑盒(he)生成不(bu)同(tong)蛋白質濃度下吸光度信號(hao)變化的(de)(de)(de)平(ping)行滴定曲(qu)線，我們(men)可以(yi)確認各數據集間的(de)(de)(de)關聯。由于每個模(mo)型系統都不(bu)同(tong)，我們(men)建議客戶參考我們(men)的(de)(de)(de)滴定曲(qu)線來確定自己的(de)(de)(de)樣(yang)品上樣(yang)蛋白質濃度。 由(you)于我(wo)們的 FastScan、PathScan 和(he) PathScan RP ELISA 試劑(ji)盒是對相(xiang)對（而非絕對）定(ding)量(liang)進行驗證(zheng)(zheng)，因此它們不(bu)包含(han)標準品。相(xiang)反，我(wo)們建議樣品可依(yi)據蛋(dan)白質含(han)量(liang)或細胞數(shu)進行標準化(hua)。不(bu)過，FastScan 試劑(ji)盒會提(ti)供凍干的陽性對照，以驗證(zheng)(zheng)分析性能。
02 光密度 (OD) 信號閾值
對(dui)于(yu)(yu)待驗(yan)證的(de)(de) ELISA 試劑盒批次，陽性對(dui)照(zhao)樣品(pin)(pin)必須(xu)具有大(da)于(yu)(yu) 1.5 的(de)(de)絕對(dui)光密度 (OD) 值，而空白樣品(pin)(pin)的(de)(de)信(xin)號(hao)閾(yu)值應(ying)低于(yu)(yu) 0.3。在測試我們(men)的(de)(de) PTM 特異性 ELISA 試劑盒時，我們(men)還設(she)置(zhi)了適當的(de)(de)誘導閾(yu)值，以確保磷酸化(hua)對(dui)照(zhao)樣品(pin)(pin)的(de)(de)信(xin)號(hao)顯(xian)著高于(yu)(yu)陰性非磷酸化(hua)對(dui)照(zhao)樣品(pin)(pin)的(de)(de)信(xin)號(hao)。 此外，相對于(yu)(yu)最高滴定點(dian)，新(xin)批(pi)次(ci)ELISA 試劑盒的(de)(de)信號/空白(bai)比必(bi)須(xu)大于(yu)(yu)5.0。該(gai)值必(bi)須(xu)落(luo)入類似于(yu)(yu)現有(you)批(pi)次(ci)的(de)(de)范圍內，以便新(xin)批(pi)次(ci)符合(he)我們的(de)(de)可重(zhong)復(fu)性標準。 PathScan® Phospho-SMAD2 (Ser465/467)/SMAD3 (Ser423/425) Sandwich ELISA Kit #12001 的信號/空白比數據摘要 濃度 (mg/ml) #12001 第 34 批 #12001 第 35 批 0.075 18.3 16.9 0.0375 11.9 11.9 0.01875 7.8 7.7 0.009375 4.8 4.8
03 變異系數百分比 (%CV) 值
驗(yan)證新 ELISA 試劑盒批(pi)次的另一(yi)個關鍵參數是 %CV。為了(le)生成該值(zhi)，我(wo)們(men)對新批(pi)次中隨機選擇的三個板條運(yun)行滴定曲線(xian)，以確定每個重復的平(ping)均值(zhi) (μ) 和(he)標(biao)準差 (SD，σ)，然后(hou)應用以下(xia)公式： %CV = (σ / µ) x 100 對(dui)于待放行的新批次，現有批次與(yu)新批次之間的分析間差異必須(xu)小于 15%。 PathScan® Phospho-SMAD2 (Ser465/467)/SMAD3 (Ser423/425) Sandwich ELISA Kit #12001 的變異系數百分比 (%CV) 數據摘要 濃度 (mg/ml) #12001 第 34 批 #12001 第 35 批 標準差 %CV 0.075 2.734 3.115 0.040 1.28 0.0375 1.781 2.201 0.030 1.34 0.01875 1.166 1.425 0.028 1.93 0.009375 0.710 0.894 0.015 1.66
為了確保(bao)我們的 ELISA 試劑盒隨時(shi)間推移性能(neng)保(bao)持(chi)一致(zhi)，同時(shi)沒有信號的衰減，我們通(tong)常在保(bao)質(zhi)期過半時(shi)進行質(zhi)量控制 (QC) 跟(gen)進測試。 為您的下一次 ELISA 實驗提供高質量結果 即用型 ELISA 試劑盒可(ke)以為您的(de)(de)(de)研究帶來(lai)許(xu)多益處(chu)，前(qian)提是要從可(ke)靠的(de)(de)(de)制(zhi)造商購買這(zhe)些產品。您的(de)(de)(de)測(ce)定結果的(de)(de)(de)與使(shi)用的(de)(de)(de)抗體(ti)高度相關。在(zai)(zai) CST，我們使(shi)用經(jing)嚴格驗證的(de)(de)(de)高質量抗體(ti)作為 FastScan、PathScan 和(he) PathScan RP ELISA 試劑盒的(de)(de)(de)基礎，每個新批次在(zai)(zai)可(ke)供給客戶(hu)之前(qian)都經(jing)過全面測(ce)試。通(tong)過核實(shi)每個新批次的(de)(de)(de) ELISA 試劑盒與先(xian)前(qian)的(de)(de)(de)具有相當(dang)的(de)(de)(de)性能，我們旨在(zai)(zai)確保您的(de)(de)(de)項目(mu)按計劃進行，而無任何計劃外(wai)的(de)(de)(de)中斷。
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